Desenvolvimento de método bioanalítico para análise de aciclovir em plasma por cromatografia líquida de alta eficiência.

Abstract

A análise de fármacos em fluidos biológicos exige métodos bioanalíticos seletivos e sensíveis. A cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) é amplamente utilizada para quantificação de fármacos, metabólitos e bioativos em amostras biológicas coletadas de humanos e animais, sendo a técnica mais usada para quantificação aplicada a estudos farmacocinéticos. Para assegurar resultados confiáveis, é necessário validar a metodologia bioanalítica conforme a RDC nº 941/2024. Além disso, o preparo adequado da amostra é fundamental para reduzir interferentes e alcançar melhores resultados de sensibilidade e seletividade no método cromatográfico. Nesse sentido, este projeto realizou o desenvolvimento de uma metodologia bioanalítica para quantificação de aciclovir em plasma de rato, visando sua aplicação em ensaios farmacocinéticos de novas formulações orais de liberação modificada. Para isso, amostras de plasma de rato foram fortificadas com concentrações conhecidas de aciclovir (substância química de referência), e o preparo de amostras foi realizada por precipitação de proteínas, incluindo a adição de um padrão interno (ganciclovir). As condições cromatográficas para a separação por CLAE foram devidamente otimizadas: utilizou-se uma coluna com recheio fenil (250 x 4,6 mm d.i.) em forno a 30° C, fase móvel composta por água acidificada com 1% v/v de ácido acético, empregando um fluxo de 1,0 mL/min. A detecção do aciclovir foi realizada no UV a 252 nm, com injeção de 20 µL da amostra preparada. O método bioanalítico desenvolvido foi sensível, preciso, exato, linear e seletivo, sem observar efeitos residuais entre injeções das amostras. Com isso, validou-se um método bioanalítico para quantificar o aciclovir em plasma de rato, com potencial aplicação em estudos farmacocinéticos de novas formulações.