Potencial vacinal de uma proteína quimérica na proteção contra a leishmaniose visceral : estudo de imunogenicidade e potência em modelo murino.

Abstract

No Brasil, a leishmaniose visceral canina (LVC) é um problema de saúde pública, principalmente diante de sua expansão verificada em diversos centros urbanos. A alta prevalência de cães infectados, incluindo animais assintomáticos, dificulta o controle da doença. Por isso, destaca-se a necessidade de desenvolver uma vacina que pode se apresentar como uma medida adicional e efetiva para o controle da doença. O presente estudo teve por objetivo avaliar a imunogenicidade e eficácia vacinal conferida após imunização com uma proteína quimérica (Quimera B) associada a um sistema de adjuvantes em camundongos BALB/c. A Quimera B é composta por epítopos de linfócitos T pertencentes às proteínas de Leishmania infantum (L. infantum) descritas na literatura como candidatas vacinais (CPA, CPB, PSA-50S e A2). Para tanto, os animais foram divididos em: (1) Grupo Controle Salina; (2) Grupo Adjuvante Saponina e Monofosforil lipídio A (SM); (3) Quimera B e (4) Quimera B associada ao sistema de adjuvantes (Quimera B + SM). Os camundongos receberam três imunizações subcutâneas, com intervalo de 15 dias entre as doses, seguido do desafio experimental com 1x107 promastigotas de L. infantum, 15 dias após a terceira e última dose. Após 45 dias do desafio experimental, foram eutanasiados para coleta de baço e fígado. Foram avaliadas a proliferação de linfócitos T totais (CD3+) e suas subpopulações (CD3+CD4+ e CD3+CD8+) e a produção de citocinas intracitoplasmáticas (IFN-γ e IL-10), in vitro após estimulação com antígeno solúvel de L. infantum (ASLi), por citometria de fluxo. Além disso, foi determinada a quantificação da carga parasitária nos órgãos-alvo da doença, baço e fígado, por PCR em tempo real (qPCR). Observou-se que as imunizações com a proteína quimérica B (Quimera B e Quimera B + SM) levaram ao aumento da proliferação de linfócitos T específicos, bem como da produção de IFN-γ por essas células. Adicionalmente, a imunização induziu a redução dos níveis da citocina imunomoduladora IL-10. No que diz respeito a eficácia vacinal, cabe destacar a expressiva redução da carga parasitária, tanto no baço quanto no fígado, observada nos animais imunizados com a Quimera B associada ao sistema de adjuvantes em comparação aos demais grupos. Os resultados obtidos foram promissores, demonstrando que a imunização com a proteína quimérica foi capaz de desencadear uma resposta imunológica satisfatória, seja sozinha ou associada ao sistema de adjuvantes, sendo considerada altamente imunogênica. Ainda, quando formulada com os adjuvantes apresentou elevada eficácia vacinal demonstrada pela baixa carga parasitária observada, conferindo proteção contra a infecção por Leishmania.