Aplicação de análises in silico na seleção de peptídeos com potencial atividade antitumoral para o tratamento de diferentes tipos de câncer de mama.

Abstract

O câncer de mama é uma neoplasia caracterizada pela multiplicação de células anormais da mama, que podem dar origem a um tumor capaz de invadir outros órgãos do corpo humano. Representa o segundo tipo de câncer com maior incidência em mulheres, e a causa mais frequente de morte por câncer na população feminina brasileira. Apesar da efetividade de tratamentos convencionais como a quimioterapia e a radioterapia, observa-se a ocorrência de muitos efeitos colaterais devido à baixa seletividade e especificidade do tratamento em relação ao tumor. Sendo assim, é de extrema importância o desenvolvimento de terapias menos invasivas e a aplicação de novas moléculas bioativas com maior seletividade e especificidade. Nesse contexto, o presente trabalho propôs um estudo in silico para a seleção de peptídeos com potencial atividade antitumoral que apresentam potencial de ligação em proteínas de membrana superexpressas em linhagens de câncer de mama. Realizou-se um levantamento acerca das alterações na expressão do proteoma de membrana de duas linhagens mamárias semelhantes à maioria dos tumores humanos (MCF-7 e MDA-MB-231) para seleção de proteínas de membrana diferencialmente expressas. A partir das proteínas selecionadas, analisaram-se as redes de interação proteína-proteína (PPI) seguido de alinhamento múltiplo de sequência FASTA, para a identificação de motivos (sequências peptídicas) similares em sequências aleatórias de proteínas. Em seguida, realizou-se uma análise de docking molecular para predizer as melhores orientações dos ligantes peptídeos aos receptores, representados pela proteína central da rede de interação. Por fim, foi avaliado o potencial imunogênico das sequências obtidas a fim de se selecionar os melhores candidatos. O levantamento bibliográfico possibilitou a identificação de 49 proteínas de membrana diferencialmente expressas para a linhagem MCF-7 e 54 para a linhagem MDA-MB-231. Após a construção das respectivas PPIs e do alinhamento das sequências de proteínas que interagiam com a proteína alvo nas PPIs, obteve-se 109 sequências peptídicas candidatas para a linhagem MCF-7 e 113 para a linhagem MDA-MB-231. A partir desses motivos, considerando os resultados obtidos com o docking molecular e com a predição de imunogenicidade, identificamos 7 sequências com potencial capacidade de interação com proteínas de membrana para a linhagem MCF-7 e 5 para a linhagem MDA-MB-231. Os resultados, obtidos através de uma estratégia inovadora, sugerem que os peptídeos são bons candidatos para atuarem como moléculas bioativas, promovendo com seletividade atividade antitumoral no câncer de mama. Para a continuidade do presente trabalho, espera-se realizar a síntese em fase sólida das sequências selecionadas seguido de uma avaliação do potencial citotóxico destas em cultivos celulares das linhagens mencionadas e da linhagem MCF10 (controle de mama normal). Por fim, em um momento posterior, espera-se que essas sequências peptídicas sejam incorporadas em nanopartículas e possam atuar em terapias efetivas contra o câncer de mama Luminal A e Triplo Negativo.