Papel da cafeína em modelo de infecção in vitro de células J774A.1 por Leishmania major.

Abstract

A cafeína é a substância psicoativa mais consumida no mundo e exerce suas ações por antagonizar os quatro tipos de receptores de adenosina. A sinalização purinérgica tem como principal molécula sinalizadora o ATP extracelular que é um potente estimulador da resposta inflamatória. A resposta induzida pelo ATP é regulada principalmente pela ação das ectonucleotidases que são responsáveis pela hidrólise do ATP a adenosina. A adenosina (ADO) é um importante nucleosídeo que possui diversos efeitos imunomoduladores, induzindo o estabelecimento de respostas anti-inflamatórias. A hidrólise da ADO é realizada pela enzima adenosina desaminase (ADA) que promove a desaminação hidrolítica da ADO até inosina. A expressão de ectonucleotidases e a produção de ADO é uma das vias exploradas por parasitos do gênero Leishmania para evadir do sistema imunológico. Considerando as ações da cafeína, o objetivo deste estudo foi avaliar seu efeito na resposta das células J774A.1 (linhagem monocítica) durante a infecção por Leishmania major. Investigamos o efeito citotóxico da cafeína pela viabilidade celular (MTT), no qual células J774A.1 foram incubadas em meio enriquecido com cafeína. Foi realizada uma curva de crescimento dos parasitos tratados com cafeína em diferentes concentrações durante sete dias. Para investigar os efeitos da cafeína na degradação de adenosina, determinamos a atividade da ADA em células J774A.1 expostas à cafeína. Em relação à infecção, células J774A.1 foram infectadas por L. major e tratadas com 10μM de cafeína em diferentes momentos. Foi determinada a taxa de infecção e a produção de NO, IL-10 e TNF. Os resultados demonstraram que a concentração de cafeína é capaz de interferir no crescimento de células J774A.1 e Leishmania, especialmente em concentrações e tempos de exposição elevados. Não foi observado nenhuma alteração significativa na atividade da ADA decorrente do tratamento com cafeína em células J774A.1. No contexto da infecção, o tratamento com cafeína antes da infecção reduziu a produção de NO e manteve elevada as taxas de infecção em células estimuladas com LPS e IFN-γ. Os tratamentos realizados durante a infecção não alteraram a produção de NO. A produção das citocinas TNF e IL-10 não foram modificadas pelo tratamento com cafeína. Apesar dos efeitos da cafeína sobre o sistema imune, descritos na literatura, não foram observados efeitos significativos no contexto da infecção de macrófagos da linhagem J774A.1 por L. major para as doses de cafeína administradas.