Avaliação do uso da técnica de fracionamento em campo de fluxo assimétrico com detecção de fluorescência na caracterização da hidrofobicidade de superfície de nanopartículas poliméricas.

Abstract

A hidrofobicidade de superfície de nanopartículas poliméricas empregadas como nanocarreadores de fármacos é uma das características físico-químicas que mais influenciam as suas performances in vitro e in vivo. No entanto, os métodos disponíveis para avaliar a hidrofobicidade de materiais são de difícil aplicação aos sistemas nanoparticulados em meio coloidal, tais como os nanocarreadores farmacêuticos do tipo nanocápsulas oleosas e nanoesferas poliméricas. Portanto, propomos avaliar o uso da técnica de fracionamento em campo de fluxo assimétrico (AF4) para auxiliar na aplicação do método de adsorção do Rosa Bengala, padrão de ouro na caracterização de hidrofobicidade de superfície de nanopartículas. A técnica de AF4 é usada para separar macromoléculas e coloides nanométricos em suspensão aquosa, e mediando um conjunto de detector em série, pode ser usada, como proposto aqui, para caracterizar as propriedades de espalhamento de luz laser (para determinar o tamanho das nanopartículas) em conjunto com as propriedades de absorção UV-Vis e de fluorescência das nanopartículas em frações monodispersas de tamanho. Nesse trabalho, o Rosa Bengala e outros marcadores fluorescentes de natureza lipofílica ou anfifílica (Rodamina B, IR780, fluorosceína e ftalocianina de cloroalumínio), foram avaliados comparando o seu comportamento fotofísico na presença de nanopartículas poliméricas. Quando associado à superfície das nanopartículas e/ou quando em meio aquoso, o marcador fluorescente Rosa Bengala sofreu alterações quanto à sua capacidade de absorver em comprimento de onda específico e de emitir fluorescência, não sendo o marcador mais adequado para ser usado em conjunto com a técnica de AF4. Por espectrofotometria de absorção UV-VIS a Rodamina B é o marcador que menos sofreu alterações no seu comportamento fotofísico quando associado às nanopartículas poliméricas. Além disso, a Rodamina B mostrou intensa fluorescência em meio aquoso, e, portanto, foi escolhida para estudo de adsorção às nanopartículas em meio aquoso por AF4. Entretanto ao avaliar o marcador fluorescente Rodamina B associado às nanocápsulas oleosas e nanoesferas por AF4 foi observada a marcação seletiva de uma fração das nanopartículas de tamanho reduzido dentro da amostra total. Consequentemente, esse estudo mostra o potencial da técnica de AF4 em estudar detalhadamente a adsorção de marcador fluorescente a nanopartículas poliméricas, mas evidencia ao mesmo tempo limitações devidas à perda de fluorescência dos marcadores em meio aquoso.